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ELISA样本制备指南及注意事项

点击:998 发布时间:2023-06-21



ELISA样本制备指南及注意事项

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定义及介绍

ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,酶联免疫吸附测定)是最基础的免疫学实验之一,其理论基础是的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本,实验操作步骤并不繁琐,但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值,从而供下一步分析所用,因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。



样本制备指南


ELISA样本制备指南及注意事项

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血清

全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃,1000×g离心20min,取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血,高血脂样品


2.血浆

不匹配而出现不能检测的情况。

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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本,经BCA法测定样本蛋白含量后,建议进行蛋白浓度的统一化,避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差;例如,统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL,进行后续的稀释和检测。


试管短方案取卵之后轻微腹水也是可以进行鲜胚移植的,当然一般是不建议有腹水的情况下进行移植的,这样风险性会更高,很可能出现胚胎难以着床的情况。如果是在有轻微腹水的情况下移植的,一定要在移植之后随时观察胚胎的情况,进行相应的治疗,以保证能够成功着床。通常情况下,胚胎能否当月进行移植,是需要考虑各种条件的,一般是在取卵之后没有腹水、子宫内膜厚度达到8mm以上且激素水平合适,即可进行移植鲜胚的。

通常情况下,使用短方案做试管的都是移植的冻囊胚。因为很多患者在取卵当月都很难达到移植的条件,所以只能选择在之后进行移植冻囊胚,成功的几率也会更高。下面是关于短方案能否当月移植:

1.使用短方案能否当月移植,是需要达到一定的条件的,首先需要患者身体状态较好,没有过度刺激的症状或风险,宫腔没有明显病变,厚度最好在8mmm以上,没有腹水的情况下是可以考虑新鲜周期胚胎移植;

2.短方案通常是会选择冻囊胚移植的,也就说并不是在当月进行鲜胚移植,因为很多患者在取卵之后的当月身体是很难达到移植的条件的,所以会考虑移植冻囊胚;

3.通常情况下,试管短方案取卵后有轻微的腹水是不建议进行鲜胚移植的,因为很有可能影响到胚胎的着床,这种情况试管的成功几率是不高的。


参考资料

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